果蝇的单因子杂交

根据孟德尔的颗粒遗传学理论，基因是一个独立的结构与功能单位，在杂合状态时不 发生混淆，完整地从一代传递到下一代，由该基因的显隐性决定其在下一代的性状表现。单因子杂交是指一对等位基因间的杂交。孟德尔第一定律指出，一对杂合状态的等位基因保持相对的独立性，其自交后代中表型分离比为 3 ： l 。本实验将观察果蝇单因子杂交后代的表型及其分离情况。

一、实验目的

1 ．通过实验深刻理解孟德尔分离定律。

2 ．学习遗传学实验结果记录及统计处理方法。

二、实验材料

黑腹果蝇 ( Drosophila melanogaster ) 的两个品系：

野生型：长翅果蝇 (+ ／ +)

突变型：残翅果蝇 (vg ／ vg)

野生型果蝇的双翅为长翅 (+ ／ +) ，翅长超过尾部。残翅果蝇 (vg ／， g) 的双翅几乎没有，只留少量残痕，无飞翔能力。

三、 仪器设备

立体解剖镜，恒温培养箱，天平，培养瓶及麻醉瓶，毛笔及白瓷板。

四、药品试剂

乙醚，玉米粉，琼脂，红糖，酵母粉，丙酸。

五、实验步骤

1 ．交配方式：用纯系残翅果蝇 ( 雌 ) 与长翅果蝇 ( 雄 ) 交配，此为正交实验；反交实验以长翅果蝇为母本，残翅果蝇为父本，由此得 P1 代。孔代雌雄个体相互交配， F2 代出现性状分离，如下图所示。

上图为正交实验果，同学们可自己列出反交实验过程。

2 ．选野生型和残翅果蝇为亲本。雌蝇一定要选处女蝇，可在实验前 2 ～ 3d 陆续收集，雌雄个体分开培养，数目多少根据需要而定。

3 ．首先把残翅处女蝇倒出麻醉，挑 5 只移到水平放置的杂交瓶中，再把长翅倒出麻醉，挑选 5 只雄蝇，移到上述杂交瓶中。等杂交亲本在杂交瓶中全部苏醒后，将杂交瓶直立，并移人 25 ℃ 温箱中培养。同刚，按上述操作进行反交实验接种培养。注意贴好标签：

4 ． 7d 后，释放杂交亲本。

5 ．再过 4 — 5d ， F1 成蝇开始出现，观察 F1 翅膀，连续检查 2 － 3d ，或在释放亲本 7d 后集中观察。

6 ．选取正、反交各 5 对 Fl 雌雄果蝇，分别移如一新培养瓶 ( 这里不需用处女蝇 ) ，置 2 5 ℃ 温箱中培养。

7 ． 7d 后，释放 Fl 亲本。

8 ，再过 4 — 5d ， F2 成蝇出现，开始观察。可连续统汁 7 － 8d 。被统计过的果蝇倒入水槽冲掉。

六、实验结果

1 ．观察并统计正、反交 F1 代的表型及个体数，比较正，反交实验结果，分析基因间的显隐性关系。

2 观察并统计正、反交 F2 代的表型及各种表型的个体数，计算不同表型个体数的比例，比较正、反交实验结果。

3 ．根据你的结果，对该实验 F2 代的统计结果作 X 2 测验。数据填入下表：

自由度： n — 1

X 2 ：∑ (O — E) 2 /E=

交 X 2 表，进行差异显著水平检验，确定假说的有效性。

七、思考题

1 ．杂交实验中为什么亲本雌蝇要选用处女蝇 ?

2 ．在进行杂交和 F1 自交后一定时间为什么要释放杂交亲本 ?

3 ．分析你的实验结果是否符合孟得尔分离定律 ?