实验4
真涡虫、华枝睾吸虫及其他扁形动物

一、实验目的

1．通过对真涡虫、华枝睾吸虫的观察，比较扁形动物自由生活和寄生生活种类的形态结构特征，了解寄生种类适应寄生生活方式在形态结构上的变化。

2．认识扁形动物各纲常见种类。

二、实验材料

1．华枝睾吸虫成虫的整体装片。

2．活真涡虫、真涡虫的整体装片和横切面装片。

3．扁形动物各纲常见种类标本。

4．猪带绦虫的囊尾蚴装片。

三、实验器具与药品

显微镜、放大镜、吸管、培养皿、载玻片等。

四、实验内容与操作

（一）真涡虫（Dugesia）活体及整体、横切面装片观察

1．活体观察

吸取活真涡虫置培养皿中，用放大镜仔细观察其外形及运动（图4-1）。

外形  真涡虫身体两侧对称，背腹扁平。前端钝园呈三角形，两侧各有一司嗅觉的小叶叫耳突。前端背面，左右两侧近前缘处还各有一略呈肾形的眼点，体后端钝尖。在腹面中央距后端约三分之一处有一短管状的咽鞘，内藏有肌肉质的咽，咽尖端向外开口即为真涡虫的口。

运动与取食  真涡虫是借体表的腺体分泌粘液协助纤毛运动，向前滑行的，当真涡虫仰卧水面滑行时，用手持放大镜在对光方向观察其腹面，可见到其纤毛作波浪状的伸缩运动。将半段水丝蚓放入培养皿的中央，则可观察真涡虫的取食情况。当真涡虫接触到水丝蚓后，其吻部从口孔伸出。吃完水丝蚓后，真涡虫体内颜色发生了变化。

2．整体装片观察

取真涡虫染色整体装片标本置于低倍显微镜下观察（图4-2）。先找到口，口内为吻，吻在咽鞘内。吻的基部通三支盲肠，向前一支叫前盲肠，从两侧向后伸展的为侧盲肠。每支盲肠都有很多侧分支。体前端可见两个眼点，这是感光器官。

3．横切面装片观察

取真涡虫横切染色标本置低倍显微镜下观察（图4-3）。虫体表皮为单层柱状上皮细胞组成，上皮细胞排列紧密，含有棒状的杆状体和腺细胞。表皮下面是非细胞结构的基膜，向内是肌肉层，为一层环肌和纵肌。此外还可见到一些上下走向的肌纤维叫背腹肌。肌肉层与表皮紧贴在一起，构成体壁，也称皮肤肌肉囊，包裹着整个体内结构。除去肠腔外，在皮肤肌肉囊内充满疏松组织，这些疏松组织叫实质，可贮存养分，各器官都埋在实质中。横切面可见数个盲肠的切面，是由单层肠上皮构成的消化道，其中的腔为肠腔。如果标本是通过咽部横切的，则可见到咽及咽鞘切面的结构。

（二）华枝睾吸虫（Clonorchis sinensis）整体装片标本观察

在放大镜和低倍镜下系统地依次观察。

1．外形

注意观察其适应寄生生活的体型。华枝睾吸虫身体呈扁平叶片状，前端较窄而后端略宽。活体较柔软，虫体呈半透明淡红色，体表具一皮层。经过固定后呈灰白色，体内器官可见，在虫体后1/3处有2个前后排列的呈树枝状的睾丸，故称枝睾吸虫（图4-4）。

2．吸盘

具口吸盘和腹吸盘，口吸盘大于腹吸盘，位于虫体的最前端，腹吸盘位于虫体腹面前约1/5处。想一想吸盘有什么作用。

3．消化系统

由口、咽、食道和肠支组成。口位于口吸盘中央，其下为一球形而富肌肉的咽，咽下为短的食道，后接二肠支沿身体两侧直达后端，注意肠支末端为盲端，无肛门结构，这是扁形动物消化系统的特征。

4．排泄系统

属于分支的原肾管系统，位于身体两侧，末端终止于焰细胞。装片上可观察到左右两排泄管，在身体的后部由两管汇合而成S形的排泄囊，排泄物最后由末端的排泄孔排出。

5．生殖系统

雌雄同体，构造复杂。

雄体生殖器官 分枝状睾丸（精巢）1对，在虫体的1/3处前后排列，注意观察由每个精巢发出的一条输精小管（被染成红色），由两条输精小管汇合形成的一条输精管，输精管向前扩大形成的储精囊，储精囊前行最终开口于腹吸盘前的雄性生殖孔而通体外。

雌体生殖器官 卵巢位精巢之前，为一个略呈分叶状的结构。长椭圆形的受精囊位于卵巢和精巢之间，附有一小管，称劳氏管。在虫体两侧分布众多卵黄腺，各侧的腺体相汇合各形成一卵黄管，在虫体中部合成总卵黄管，然后与输卵管相连接。输卵管发自卵巢，在输卵管上形成一成卵腔，注意观察它是由输卵管、受精囊、劳氏管及卵黄管相汇合而成。成卵腔周围有一群单细胞腺体，称为梅氏腺，其分泌物参与卵壳的形成及润滑作用。成卵腔向前为子宫，其迂回前行于腹吸盘与卵巢之间，开口于腹吸盘前的雌性生殖孔。

（三）示范标本观察

1．涡虫纲Turbellaria

笄蛭涡虫Bipalium  陆生种类。肠分三支，一支向前，2支向后（图4-5）。

平角涡虫Planocera  海产种类。肠位于体中央向四周分出很多分支盲管（图4-5）。

2．吸虫纲Trematoda

布氏姜片虫
Fasciolopsis buski  是人体寄生吸虫中最大的一种。腹吸盘很接近口吸盘，并且比口吸盘大3-4倍。肠支波浪状，睾丸高度分枝，卵巢也分枝（图4-6）。

日本血吸虫 Schistosoma japonicum  成虫雌雄异体，雄虫比较宽而短，虫体两侧向腹面内褶，形成抱雌沟，雌虫位于沟中呈合抱状态。睾丸一般7个。雌虫较细长，略呈圆柱状。无咽，肠支在体后合并（图4-7）。

3．绦虫纲
Cestoida

猪带绦虫 Taenia solium  成虫寄生在人体小肠中，长度2-4m，具700-1000节片。观察其成熟节片，可见纵横排泄管及神经索，雌、雄生殖器官已完全成熟（图4-8）。

五、作业与思考题

1．华枝睾吸虫是如何感染人的？它寄生于人体的什么器官？

2．绘华枝睾吸虫成虫结构图，注明所观察到的器官名称。

附录：涡虫的采集、培养和制片

1．采集

涡虫纲单肠目和三肠目的一些种类栖息于山溪流水中，有一些则栖息于水洼、池塘、养鱼缸等静水中。在广州地区白云山的山溪流水，常见有三肠目的真涡虫。它附着于石头下，因涡虫个体小，色淡、采集时注意认真观察，发现了涡虫用小刀或薄铁片轻轻铲取，然后把它装在有水的棕色瓶中，并投入一些小石块有利于附着和遮光。采集时也可以利用食物诱捕，可用煮熟的蛋黄用纱布包好，每包约1-2 g重，放在溪流水的石头间。涡虫一旦发现，就会爬向这些食物，约经半小时至1小时左右，捞起这些小包，就可采集其上附着的一些涡虫。

2．培养

把采集回来的涡虫放入干净的培养缸或水族箱中培养，并投入一些小石头利用附着。用的水最好是天然水，若用自来水应该净化数天后再用。涡虫一般以小型的水生动物、硅藻以及原生动物为食饵，可以从池塘捞取。但在实验室里常将蛋黄烘干成颗粒状为食饵，每隔3-5天投入一次。同时及时清除食物残渣，保持水质干净。在室内培养涡虫应避免强光照射。

3．制片

若要显示涡虫的消化道，可用生蛋黄（去掉蛋白）+洋红或中国墨汁调成糊状，每天喂一次；每次几滴。喂2-3天后，饿一天，即可用2-5%铬酸固定，固定时用毛笔压平涡虫，稍等一会后，即用2片载玻片压平涡虫，但注意不要压破涡虫，两头用线捆上置于7%甲醛24小时保存，如制片则从甲醛中取出以3%的双氧水漂1-2小时后，便可脱水，但在脱水到90%酒精后用0.5%固绿染色再脱水，后用冬青油透明，封片。